吉林大学张卫迪等LncRNAm18as

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内容介绍

中文摘要:

目的:

探索长链非编码RNA(lncRNA)-微小RNA(miRNA)-信使RNA(mRNA)网络对促卵泡素(FSH)合成与分泌的作用,为调控FSH的分子机制提供理论基础。

创新点:

筛选出了一个新的lncRNA作为研究对象;首次鉴定并分析了该lncRNA对FSH合成与分泌的调控作用;确定了该lncRNA调控FSH合成与分泌的机制。

方法:

我们通过逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)筛选出了一个新的lncRNA,并根据功能将其最终命名为lncRNA-m18as1。经过敲降或过表达lncRNA-m18as1后,我们采用RT-qPCR与酶联免疫吸附剂测定(ELISA)分析了lncRNA-m18as1对FshβmRNA以及FSH分泌的调控作用。我们预测并确定了lncRNA-m18as1发挥作用的lncRNAm18as1/miR-18a-5p/Smad2轴。我们使用RNA结合蛋白免疫沉淀测定-逆转录定量聚合酶链反应(RIP-qPCR)和/或双荧光素酶报告分析方法分析了miR-18a-5p与lncRNA-m18as1、Smad2的靶向关系。此外,我们使用RT-qPCR和蛋白质印迹法(westernblot)分析了lncRNA-m18as1和miR-18a-5p在轴中对向下游因子的调控作用,同时通过荧光原位杂交技术(FISH)观察了lncRNA-m18as1以及miR-18a-5p在细胞核与细胞质中的分布。

结论:

研究结果表明在大鼠腺垂体中高表达且阶段性表达的lncRNA-m18as1促进FshβmRNA的表达与FSH的分泌。进一步的分子机制研究表明lncRNA-m18as1竞争性结合miR-18a-5p调控Smad2蛋白的表达,进而调控FSH的合成与分泌。

关键词组:

长链非编码RNA(lncRNA);微小RNA(miRNA);竞争性内源RNA(ceRNA);促卵泡素(FSH);Smad家族成员2/3(Smad2/3)

作者:

WeidiZHANG,WenzhiREN,DongxuHAN,GuokunZHAO,HaoqiWANG,HaixiangGUO,YiZHENG,ZhonghaoJI,WeiGAO,BaoYUAN

本文引用格式:

WeidiZHANG,WenzhiREN,DongxuHAN,GuokunZHAO,HaoqiWANG,HaixiangGUO,YiZHENG,ZhonghaoJI,WeiGAO,BaoYUAN.LncRNA-m18as1



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