与大家分享一篇来自AnimalReproductionScience的文章《养殖金钱鱼卵巢发育及生殖激素周年变化规律的研究》,文章引用信息如下:
摘要
卵母细胞发育分为卵黄发生前期、卵黄发生期、卵黄发生后期、成熟期和卵泡闭锁五个阶段。卵巢成熟过程可分为未成熟期(I期)、卵黄发生期(II期)、准备成熟期(III期)、成熟期(IV期)和退化期(V期)。初级、次级和三期卵黄的卵母细胞中,3至6月E2含量较高。7月E2、T和17-OHP与卵黄后期卵母细胞直径呈正相关。IV期卵巢细胞质完成卵黄积累并开始胚泡迁移。8月之后,性激素含量呈下降趋势。9月IV卵巢成熟前,50%卵母细胞处于最后的成熟阶段(FOM)-um。
前言
最早大约30年前,菲律宾研究表明金钱鱼每年4-10月在海水中繁殖。硬骨鱼垂体产生两种促性腺激素(GtH),即卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH),FSH调节卵黄发生和卵母细胞生长,LH刺激成熟诱导激素(MIH)的产生,以促进卵黄发生过程中卵母细胞最终成熟。E2影响垂体GtH和肝脏促卵黄生成素的合成,卵黄生成素通过胞饮作用在发育的卵母细胞中被分离。T存在雌鱼血清,可能是E2合成的前体物质。雌激素通过CYP19由雄激素合成,用于卵母细胞发育。17a,20p双羟孕酮(17a,20p-P)是硬骨鱼体内主要的MIH。
材料与方法
使用大于1龄、体重85-g的金钱鱼。年1-12月取样,每次取样15-20尾。
实验结果
01
体重与体长
金钱鱼初始和最终体长和体重的R2值不同(P0.05;分别为0.7和0.8)。
代表生长系数的斜率(b)值没有变化(图1A和b)。
图1金钱鱼体长(cm)和体重(g)散点图。(A)年1月,(B)年12月。
02
环境和卵母细胞发育的周年变化
1月卵母细胞60%处于卵黄发生前期。3月至6月II期卵巢迅速发育,含卵黄的卵母细胞比例从9%增加到36%。7月卵黄生成后期的卵母细胞比例明显增多,6至8月卵黄前期的卵母细胞较少(17%-4%)。6月和7月卵黄生成期和后期卵母细胞数量最多(43%和35%)。8到9月IV期卵巢已完成卵母细胞发育和卵黄积累。胚泡10月中旬到11月迁移到动物极,并在12月开始分解。
图2(A)年1-12月,池塘日长(小时)、水温(C)、盐度(ppt)周年变化趋势;所有值均用均值±标准差表示;(B)每月卵母细胞成熟阶段百分比(年1-12月);卵母细胞成熟阶段分为卵黄形成前期(50-um)、卵黄形成期(-um)、卵黄形成后期(-um)、成熟期(-um)、卵泡闭锁。卵巢成熟阶段分为未成熟、卵黄发生、成熟发育、成熟、退化。8月份成熟的卵母细胞占50%。10至12月卵泡闭锁。12月检测到类似液体的卵黄。
表1金钱鱼卵母细胞发育阶段
03
类固醇激素周年变化
血清E2、T、17-OHP浓度在卵黄发生前1-2月最低。E2含量3至6月间增加了4倍。7月E2浓度最高。8-9月份,IV期卵巢E2浓度降低到与II期相似水平。10月以后,17-OHP浓度在成熟卵巢中更高。50%卵母细胞7月最终成熟,之后随着卵巢成熟和卵母细胞发育,17-OHP浓度降低。T最高浓度出现在成熟卵巢中,这些卵巢含有大量卵黄形成后期的卵母细胞。与3至6月相比,12月17-OHP和T的血清浓度降低了一半。
图3不同卵巢成熟阶段血清性激素(E2、T、17-OHP)浓度变化情况,平均值±标准差(n=15-20);不同上标表示卵巢发育阶段(未成熟、卵黄发生、成熟发育、成熟、退化)的差异(P0.05)。
图4生殖季节金钱鱼卵母细胞发育阶段(n=15);每月(年1月-12月)收集不同成熟阶段卵母细胞的代表性光显微照片。
图5(A)卵黄发生前期卵母细胞组织学显微照片(年1月);年1-2月,卵母细胞出现核仁周边染色质(PNS)和皮层肺泡(CA);(B)年3-5月卵黄形成早期,卵母细胞中央有胚泡(GV),PNS和CA很少;(C)四月之后,随着油滴(OD)增加,处于初级和次级卵黄阶段的卵母细胞增加,而初级发育阶段的比例降低。(D)卵黄后期(年6-8月),卵黄颗粒增加(YG),油滴增多(OD),胚泡移动(GV);(E)成熟卵母细胞油滴数量增加,油滴融合形成单个油滴(OG),油滴逐渐向胞质外周移动,融合至液体卵黄(FY;年8-9月),大部分卵母细胞有完整的胚泡迁移(GVM)和胚泡破裂(GVBD);(F)年10-12月,卵巢存在大量水合卵母细胞(HYD)和闭锁卵母细胞(AO)。
小结
卵黄发生前期的卵母细胞类固醇浓度较低表明,在每年最初几个月卵巢开始再生周期(I期)。卵黄发生在夏季的3-6月,本研究E2和T的增加证明该结论。成熟期(III期)血清性激素浓度最高,8月以后E2、T浓度逐渐降低,17-OHP浓度逐渐升高,提示此时卵黄发生已经完成。10月之后闭锁卵母细胞出现衰退期。
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